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Thermo 89882 Zeba™ 脫鹽離心柱用戶指南

更新時(shí)間:2025-04-29      點(diǎn)擊次數(shù):451

Thermo 89882 Zeba™ 脫鹽離心柱用戶指南

一、產(chǎn)品概述

Thermo 89882 Zeba™ 脫鹽離心柱是賽默飛世爾科技(Thermo Fisher Scientific)旗下Zeba™系列的核心產(chǎn)品,專為蛋白及生物樣品快速脫鹽設(shè)計(jì)。該離心柱采用7K MWCO(分子量截留值)高性能體積排阻色譜樹脂,通過離心操作實(shí)現(xiàn)高效脫鹽,同時(shí)保留大分子蛋白,適用于手動(dòng)或自動(dòng)液相色譜(LC)前處理流程。

二、技術(shù)規(guī)格

  • 截留分子量(MWCO):7,000 Da

  • 適用體積范圍:0.5 mL(單柱容量,支持30–130 µL樣品體積)

  • 樹脂類型:專有高性能體積排阻色譜樹脂

  • 包裝規(guī)格:25柱/盒(貨號(hào)89882)

  • 儲(chǔ)存條件:4°C保存,常溫運(yùn)輸

  • 回收率:對(duì)>7,000 Da蛋白回收率≥95%,去除≥95%鹽及小分子污染物(<1,000 Da)

三、核心功能

  1. 高效脫鹽

    • 通過體積排阻色譜原理,小分子鹽類(如NaCl、Tris等)隨緩沖液流出,大分子蛋白被樹脂截留。

    • 兼容高鹽濃度(如1 M NaCl)樣品,無需稀釋。

  2. 高回收率

    • 專有樹脂設(shè)計(jì)降低蛋白非特異性結(jié)合,即使低濃度蛋白(25 µg/mL)仍可保持高回收率。

  3. 快速操作

    • 單次離心(1,000 × g,2分鐘)即可完成脫鹽,無需色譜系統(tǒng)或樹脂平衡步驟。

    • 一張96孔Zeba脫鹽板可在5分鐘內(nèi)處理96份樣品。

  4. 兼容性

    • 與主流自動(dòng)液相色譜系統(tǒng)(如AKTA)兼容,支持手動(dòng)注射器或自動(dòng)化工作站操作。

四、操作流程

(一)離心柱預(yù)處理
  1. 去除儲(chǔ)存液

    • 掰斷柱子尾部并松開蓋子,置于15 mL離心收集管中。

    • 1,000 × g離心2分鐘,棄去收集管中液體。

  2. 樹脂平衡

    • 向柱子中加入1 mL緩沖液(如PBS),1,000 × g離心2分鐘,棄去液體。

    • 重復(fù)此步驟2–3次,確保樹脂充分平衡。

(二)樣品上樣
  1. 樣品加載

    • 將柱子置于新收集管中,緩慢加入30–130 µL樣品至樹脂中心。

    • 可選壓層:對(duì)于<70 µL樣品,樣品吸收后加入15 µL超純水或緩沖液。

  2. 離心脫鹽

    • 1,000 × g離心2分鐘,收集管中液體即為脫鹽樣品。

(三)后續(xù)分析
  • 脫鹽樣品可直接用于SDS-PAGE、質(zhì)譜分析、酶活性測定或液相色譜純化。

五、常見問題與解決方案


問題可能原因解決方案
樣品或緩沖液無法流穿離心機(jī)故障或柱子堵塞檢查離心機(jī)狀態(tài),避免接觸柱子邊緣
產(chǎn)量低未使用壓層對(duì)<70 µL樣品添加壓層
蛋白回收率低蛋白不穩(wěn)定使用合適緩沖液平衡柱子


六、應(yīng)用場景

  1. 蛋白質(zhì)組學(xué):去除樣品中高濃度鹽類,優(yōu)化質(zhì)譜分析結(jié)果。

  2. 藥物研發(fā):快速脫鹽后進(jìn)行藥物-蛋白結(jié)合研究。

  3. 生物制藥:緩沖液置換以適應(yīng)下游純化工藝。

  4. 高通量篩選:結(jié)合96孔板實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化脫鹽。

七、注意事項(xiàng)

  1. 儲(chǔ)存條件:收到后立即4°C保存,避免樹脂干燥。

  2. 樣品兼容性:適用于>7,000 Da蛋白,小分子蛋白(如肽段)可能被截留。

  3. 安全操作:樹脂懸液含0.05%,避免接觸皮膚或吸入。



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